VB12 檢測方法主要有液相色譜法、液 質聯用法、酶聯免疫法、原子吸收光譜法、化學發光分析法、微生物法等。 微生物法是經典的 VB12 測定方法,利用萊式曼 氏乳桿菌對 VB12 的特異性,可靈敏地檢測出基 質中 VB12,微生物法具有特異性強、靈敏度高、 檢出限低、不易漏檢的特點。超凈工作臺:HCB-1300V 型,海爾生物醫 療有限公司;分析天平:AL-204 型,賽多利 斯科學儀器有限公司;生化培養箱:LRH-250F型,上海一恒科學儀器有限公司;立式壓力蒸汽 滅菌鍋:YXQ-LS-50S II 型,上海博迅醫療生物 儀器股份有限公司;紫外分光光度計:UV-1800 型,日本島津;離心機:LD5-2B 型,廣州市丹 安儀器儀表有限公司;pH 計:PHS-3C,上海精 科儀器有限公司。
采取的是進口 美國菌株,較之前國產菌株活性及穩定性、純度 更好。標準菌株萊式曼氏乳桿菌的活性和濃度是 影響微生物法檢測 VB12 成功的基礎和前提,萊 式曼氏乳桿菌為厭氧菌,在試驗用菌的傳代培養 過程中,要嚴格執行厭氧條件,并控制好傳代次 數;標準系列及樣品液的培養時間、pH、培養溫 度會影響萊式曼氏乳桿菌的生長繁殖,也需要嚴 格控制這些生長條件。之前一直用國外 BD 培養基,成本比較高,目前國產培養基也能夠達 到良好的試驗結果,且成本相對較低。