獲得 HMOs 的絕對含量，仍然需要標(biāo)準(zhǔn)品 和標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法。本試驗應(yīng)用 LC-MS 建立快速、 穩(wěn)定、靈敏度高的檢測母乳中低聚糖定性及定量的方 法，應(yīng)用該方法分析不同哺乳期過程中各種低聚糖的 變化情況。Waters TQ-S 電 噴 霧 質(zhì) 譜 儀 ，Waters Acquity UPLC system，美國 Waters 公司；Eppendorf 5430R 低 溫高速離心機(jī)，德國 Eppendorf 公司；SW-CJ-2FD 超 凈工作臺，上海博迅實業(yè)有限公司。色譜柱：Inertsil Hilic柱(2.1 m× 150 mm)；流動相：A 液為乙腈，B液為50 mol/L 乙酸銨溶液(pH 4.5)。樣品 置于4 ℃自動進(jìn)樣器中，柱溫40 ℃，流速400 μL/min， 進(jìn)樣量5 μL。梯度洗脫條件：95%流動相A和5%流動 相B洗脫2 min，然后至13 min流動相B由5%至25%， 然后至18 min流動相B由25%至50%，保持洗脫6 min。

       采用 Waters TQ-S 電噴霧質(zhì)譜儀對不同 泌乳期的母乳低聚糖進(jìn)行檢測，我們將不同泌乳期的 母乳分為初乳、過渡乳及成熟乳。其中，初乳是生產(chǎn) 后第1到第12天的母乳，過渡乳是生產(chǎn)后第13天至第 30 天的母乳，成熟乳是生產(chǎn)后第 2 個月以后的母乳。 在收集的所有不同泌乳期母乳樣品中，檢測到 6種 HMOs的組成和含量均在不斷 變化。其中 2'-FL、6'-SL、LNnT、LNFP-I 的含量隨 著泌乳期的延長而逐漸降低。通過檢測分析產(chǎn)婦泌乳后母乳低聚糖含量及組 分變化情況發(fā)現(xiàn)，通過自然生產(chǎn)的產(chǎn)婦母乳中低聚糖 的含量與剖腹產(chǎn)產(chǎn)婦母乳中低聚糖的含量有一定的 差異。其中，通過自然生產(chǎn)的產(chǎn)婦母乳中2'-FL、LN? FP-I的含量均略高于剖腹產(chǎn)產(chǎn)婦母乳中的含量。而 剖腹產(chǎn)產(chǎn)婦母乳中 LNnT 的含量則略高于自然生產(chǎn) 的產(chǎn)婦母乳中的含量。